人小肠三叶因子在毕赤酵母中克隆表达及对肠粘膜修复作用的研究

作者：刘伟; 郑华宝; 钟雪梅; 杨晟; 许春娣

来源：生物工程学报, 2007, 23(5): 824-830.

DOI：10.3321/j.issn:1000-3061.2007.05.011

• 人肠三叶因子
• 毕赤酵母
• 表达
• 粘膜修复

为了研究人肠三叶因子(hITF)对肠粘膜的保护作用,利用RT-PCR从肠粘膜中扩增出hITF基因片段,与诱导分泌型毕赤酵母载体pPIC9连接构建了重组质粒pPIC9hITF,重组质粒转化至宿主菌GS115,经过PCR鉴定和转化子发酵筛选,得到一个重组毕赤酵母高产菌株GS115/pPIC9hITF.在5L发酵罐中用基本盐培养基培养重组菌株,添加甲醇诱导表达hITF,离心收集的上清液通过离心交换层析纯化得到hITF.质谱鉴定结果表明纯化的hITF与天然提取产品在N端序列上完全相同.细胞实验和动物实验结果表明重组hITF能够促进细胞迁移,并可以保护肠粘膜免受有害因子的侵袭,保持了较好的生物学活性.

• 单位
  上海生命科学研究院植物生理生态研究所; 上海交通大学医学院附属瑞金医院