基于AMH/AMHRⅡ信号通路探讨消囊调经汤治疗PCOS-IR模型大鼠的作用机制

作者：周艳艳; 袁俊俊; 黄旭博; 刘沛沛; 吴梦瑶; 董亚娜^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 29(09): 137-145.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20230568

• 多囊卵巢综合征(PCOS)
• 胰岛素抵抗(IR)
• 消囊调经汤
• 抗苗勒氏管激素(AMH)/抗苗勒氏管激素Ⅱ型受体(AMHRⅡ)信号通路
• 糖脂代谢
• 骨形态发生蛋白-15(BMP-15)
• Smad5

目的：基于抗苗勒氏管激素(AMH)/抗苗勒氏管激素Ⅱ型受体(AMHRⅡ)信号通路，探讨消囊调经汤改善多囊卵巢综合征伴胰岛素抵抗(PCOS-IR)模型大鼠的作用机制。方法：48只成年雌性SD大鼠随机分为空白组、模型组、消囊调经汤组(11.4 g·kg-1·d-1)、达英-35组(0.21 g·kg-1·d-1)，除空白组外各组大鼠通过高脂高糖饮食联合来曲唑构建PCOS-IR模型，给药组灌胃给予相应剂量药物15 d，每给药4 d间隔1 d，空白组及模型组灌胃给予等体积生理盐水。治疗期间每天记录大鼠动情周期，治疗结束后记录体质量、Lee’s指数，采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定AMH、促黄体生成素(LH)、LH/卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)、雌二醇(E2)水平，血糖仪检测空腹血糖(FPG)，放射免疫分析法(RIA)检测空腹胰岛素(FINS)水平，计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感性指数(QUICKI)，全自动生化检测仪测定甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)水平，苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢组织形态学变化，免疫组织化学法(IHC)检测卵巢组织内AMHRⅡ、骨形态发生蛋白-15(BMP-15)、Smad5蛋白水平，蛋白免疫印迹法(Western blot)分析AMHRⅡ、BMP-15、Smad5蛋白表达水平。结果：与空白组大鼠比较，模型组大鼠阴道脱落细胞可见大量白细胞，以动情间期为主；体质量、Lee’s指数、糖脂代谢指标(FPG、FINS、HOMA-IR、TG、TC)、AMH及性激素(LH、LH/FSH、T)水平显著上升(P<0.01),QUICKI及E2水平显著下降(P<0.01)；卵巢表面囊性突起较多、湿重较大，卵巢组织有较多闭锁状、囊性扩张性卵泡，颗粒细胞层厚度减少，不见卵母细胞；卵巢组织中AMHRⅡ蛋白表达水平显著上升(P<0.01),BMP-15、Smad5蛋白表达水平显著下降(P<0.01)。与模型组大鼠比较，消囊调经汤组大鼠阴道脱落细胞于治疗第5～6天起见角化细胞，逐渐出现稳定的动情周期；体质量、Lee’s指数、糖脂代谢指标(FPG、FINS、HOMA-IR、TG、TC)、AMH及性激素(LH、LH/FSH、T)水平明显下降(P<0.05,P<0.01),QUICKI及E2水平显著升高(P<0.01)；卵巢表面较光滑、湿重较轻，卵巢组织可见卵母细胞及成熟卵泡，颗粒细胞层厚度增加，形态完整；卵巢组织中BMP-15、Smad5蛋白表达水平显著上升(P<0.01),AMHRⅡ蛋白表达水平显著下降(P<0.01)。结论：消囊调经汤可能通过下调AMH/AMHRⅡ的同时介导PCOS-IR大鼠卵巢组织中BMP-15、Smad5上调，从而改善大鼠卵巢功能、性激素及糖脂代谢水平。

• 单位
  河南中医药大学; 黄河科技学院; 河南省中医院