一种快速灵敏非特异性核酸酶酶活测定方法

作者：高婷; 朱瑜; 赵晨; 葛燕; 李端华; 李进军; 王辂^*

来源：生物学杂志, 2021, 38(06): 111-130.

• 非特异性核酸酶
• 酶活力
• 高通量
• 光密度
• 凝胶成像

根据脱氧核糖核酸与Gelred结合形成的荧光络合物在紫外灯照射下发出荧光的原理,建立一种更适用实际应用的快速、简单高通量的非特异性核酸酶酶活测定方法。采用脱氧核糖核酸为底物,利用凝胶成像仪测定底物减少引起光密度的变化值,从而计算出非特异性核酸酶活力。研究了影响酶活测定的关键因素,并对该方法的线性、准确度、精密度、检测限与定量限进行了验证。结果表明,方法最佳反应时间为3 min,待测酶活线性范围在4.17～9.01 U/μL,线性关系、精密度、准确度和灵敏度均符合方法学开发评估要求。相较于紫外吸收法,此方法检测限更低,反应时间更短,且能用于多个样品的分析。

• 单位
  中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所; 成都大学