香蕉类胡萝卜素合成基因MtSSUII克隆与遗传转化

作者:李春燕; 颜航; 荆永琳; 王小冰; 李志英; 张玄兵; 陈浪欣; 李玉莲; 徐立*
来源:分子植物育种, 2023, 1-8.

摘要

SSUII是植物类胡萝卜素合成途径中的关键基因。通过对富含类胡萝卜素的TTT基因型香蕉Karat转录组数据的分析,筛选得到与香蕉类胡萝卜素合成相关的SSUII基因。利用PCR技术从Karat香蕉叶片组织中克隆出SSUII基因的cDNA序列并测序成功。进行蛋白质理化性质分析,结果显示SSUII基因序列开放阅读框(ORF)为1 053 bp,编码350个氨基酸,分子质量为37.10 kD,且SSUII蛋白为疏水性不稳定蛋白。通过对比分析发现,该SSUII蛋白序列具有PTS家族的保守结构域——富天冬氨酸的FARM结构域,定名为MtSSUII。荧光定量PCR结果表明,同一生长时期不同基因型香蕉中,MtSSUII基因表达量存在差异,其中TTT>BB>AAA;同一生长时期TTT基因型Karat香蕉不同部位MtSSUII基因相对表达量不同,表达量由高到低依次为果实>茎>花>根>叶。对遗传转化获得的香蕉过表达转基因植株进行35S启动子检测发现有4株为阳性植株,对其进行检测分析得出转基因阳性植株中MtSSUII基因的相对表达量高于未转化植株,且阳性植株的类胡萝卜素含量检测多于对照植株。综上所述,初步判定MtSSUII基因在香蕉类胡萝卜素合成路径中起正调控作用,促进香蕉类胡萝卜素合成。本研究探究MtSSUII基因对类胡萝卜素合成的响应机制,为高类胡萝卜素香蕉培育提供理论与技术参考。