miR-27a-3p靶向Rnd3对氧糖剥夺/复氧诱导的神经细胞凋亡的影响

作者：李俊杰; 白文娅; 陈文栋; 杨伟; 邵建林

来源：实用医学杂志, 2023, 39(23): 3051-3057.

• miR-27a-3p
• 氧糖剥夺/复氧
• Rnd3
• 细胞凋亡

目的 探讨miR-27a-3p调控Rho家族GTP酶3(Rnd3)在氧糖剥夺/复氧（OGD/R）神经细胞凋亡中的作用及机制。方法 体外培养大鼠PC12神经细胞，氧糖剥夺2 h后分别复氧3、6、9和12 h，检测各时刻细胞活力、miR-27a-3p和Rnd3 mRNA的表达筛选最适复氧时间点。采用慢病毒分别转染miR-27a-3p Mimic、miR-27a-3p Inhibitor及二者的阴性对照、转染shRnd3及其阴性对照、或共转染shRnd3和miR-27a-3p Inhibitor入细胞后，CCK-8法检测细胞的活力；流式细胞术检测细胞的凋亡率；RT-qPCR检测miR-27a-3p和Rnd3 mRNA的表达；Western blot检测凋亡相关蛋白和Rnd3蛋白的表达；双荧光素酶报告基因实验验证miR-27a-3p和Rnd3的靶向关系。结果 上调miR-27a-3p提高了细胞活力，降低了细胞的总凋亡率、抑制了促凋亡蛋白Cleaved Caspase-3(C-caspase-3)、Bax和促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，差异有统计学意义（P <0.05）；下调miR-27a-3p则出现相反的结果。双荧光素酶报告基因实验显示Rnd3是miR-27a-3p的靶基因。下调Rnd3提高了细胞活力，降低了细胞的总凋亡率、抑制了促凋亡蛋白C-caspase-3、Bax和促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达，差异有统计学意义（P <0.05）。然而，miR-27a-3p Inhibitor逆转了shRnd3的保护作用。结论 miR-27a-3p通过靶向抑制Rnd3抑制细胞凋亡减轻PC12神经细胞的OGD/R损伤。

• 单位
  昆明医科大学第一附属医院