抗HBc-ScFv基因复制缺陷型腺病毒载体的构建及其体外表达

作者：汤正好; 马会慧; 臧国庆; 余永胜; 李刚; 姚集鲁

来源：世界华人消化杂志, 2005, 13(06): 734-738.

DOI：10.3969/j.issn.1009-3079.2005.06.008

• 抗HBc ScFv基因
• 复制缺陷型
• 重组腺病毒载体 Anti-HBc ScFv
• Replication-deficient
• Recom-binant adenoviral vector

目的:构建表达抗乙型肝炎病毒核心蛋白单链抗体(抗HBc ScFv)的复制缺陷型腺病毒载体,并检测其能否在真核细胞中有效表达目的基因. 方法:采用DNA重组技术将特异性人源性抗卜HBc单链抗体基因克隆于腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV,与5 型腺病毒骨架质粒pAdeasy-1共转染B15183细菌,经细菌内同源重组产生携带抗HBc ScFv基因的重组腺病毒载体pAd—ScFV,经脂质体法转染293细胞,包装产生携带抗HBc scFv基因的重组腺病毒Ad—scFv,体外转染HepG2细胞,PCR和ELISA法检测目的基因及其表达. 结果:构建了表达抗HBc ScFv基因的复制缺陷型腺病毒,病...

• 单位
  中山大学附属第三医院; 上海交通大学