姜黄素对高糖诱导的大鼠视网膜血管内皮细胞凋亡的影响

作者：黄江; 李翊; 肖建江; 徐国旭; 卜曙; 罗蔚锋^*

来源：中华眼底病杂志, 2017, 33(05): 513-517.

• 姜黄素
• 视网膜血管／细胞学
• 内皮细胞
• 细胞凋亡
• NF-κB

目的观察姜黄素对高糖诱导的大鼠视网膜血管内皮细胞(RRVEC)凋亡的影响。方法取对数生长期原代培养的第4代RRVEC进行实验, 采用免疫荧光染色法鉴定培养的细胞, 并对内皮细胞的特异性标志物血管性假性血友病因子(vWF)的表达进行检测。将培养的RRVEC分为对照组、高糖组和姜黄素干预组。对照组细胞正常培养。高糖组细胞经30 mmol/L的葡萄糖培养。姜黄素干预组细胞经30 mmol/L的葡萄糖培养24 h后, 再加入30 μmol/L姜黄素处理24 h。采用流式细胞仪检测各组细胞内活性氧(ROS)相对含量及细胞凋亡的变化情况。采用免疫细胞化学染色法检测各组细胞中核因子(NF)-κB p65的蛋白表达。采用蛋白免疫印迹法检测各组细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2 (Bcl-2)、Bcl-2相关x蛋白(Bax)的蛋白表达。结果分离得到的RRVEC在1周后呈铺路石样单层贴壁生长。培养获得的细胞vWF表达呈强阳性。对照组、高糖组及姜黄素干预组RRVEC中ROS相对含量、细胞凋亡率比较, 差异有统计学意义(F=40.957、325.137, P=0.000、0.000)。与对照组比较, 高糖组RRVEC中ROS相对含量、细胞凋亡率明显增加, 差异有统计学意义(t=8.677、25.500, P=0.000、0.000)。与高糖组比较, 姜黄素干预组RRVEC中ROS相对含量、细胞凋亡率明显降低, 差异有统计学意义(t=6.568、12.818, P=0.000、0.000)。与对照组比较, 高糖组RRVEC中NF-κB p65 (t=8.322, P=0.000)、Bax (t=3.813, P=0.009)蛋白表达明显增加, Bcl-2蛋白表达(t=4.362, P=0.005 )及Bcl-2/Bax比值(t=6.449, P=0.001 )明显降低, 差异有统计学意义(P<0.05)。与高糖组比较, 姜黄素干预组RRVEC中NF-κB p65、Bax (t= 2.577、3.059, P=0.042、0.022)蛋白表达明显降低, Bcl-2/Bax比值(t=3.831, P=0.009)明显提高, 差异有统计学意义(P<0.05 )。结论姜黄素能抑制高糖诱导的RRVEC凋亡, 其机制可能与增强Bcl-2表达、下调Bax表达从而抑制NF-κB信号通路有关。

• 单位
  神经内科; 复旦大学附属华山医院; 苏州大学附属第二医院