Cyclin B1的启动子在HeLa细胞cyclin B1蛋白调控中的作用

作者:王昱; 卢仲义; 许峰; 朱宇迪; 朱宇熹
来源:第三军医大学学报, 2009, (24): 2440-2443.
DOI:10.16016/j.1000-5404.2009.24.030

摘要

目的通过检测细胞周期素B1(cyclinB1)的启动子在HeLa细胞的不同细胞周期的活性变化,探讨其对cy-clinB1蛋白的调控作用。方法采用PCR法获得HeLa细胞cyclinB1的启动子,通过基因重组插入pGL3promotervector从而获得质粒pGL3/cyclinB1promoter。采用羟基脲(hydroxyurea,HU)对HeLa细胞进行细胞周期G1、S、G2/M期的同步化,通过流式细胞术法确认。用短暂转染的方法,将重组的质粒转染至HeLa细胞。通过双萤光素酶活性检测分析cyclinB1的启动子在HeLa细胞周期G1、S、G2/M期的活性的变化。结果双荧光素酶活性检测cyclinB1的启动子活性在G1期最高,S期最低,G2期中等。结论在HeLa细胞中cyclinB1的启动子活性和cyclinB1蛋白的表达并不同步。

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