摘要
目的动态观察日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗免疫BALB/c小鼠后诱导的免疫应答,探讨该疫苗的免疫机制。方法将日本血吸虫重组Bb(pGEX-Sj32)疫苗分别经口服(PO)和滴鼻(IN)途径免疫BALB/c小鼠,在免疫后020周,每隔2周每组随机剖杀4只小鼠,取脾并制备脾细胞悬液,用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测脾细胞增殖水平、流式细胞仪(FACsort)检测脾CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群和脾细胞凋亡、双抗体夹心ELISA法检测血清及脾细胞培养上清液中细胞因子IL-10、IL-12和TNF-α水平和血清抗体IgG及其亚类、IgE和IgA的动态变化。结果当SjAWA和ConA刺激或不刺激时,PO组和IN组脾细胞增殖水平均于免疫后6周达最高水平,分别于6周和8周达最高脾细胞凋亡发生率,脾CD4+T细胞亚群百分比分别在6周和8周达峰值,两组CD8+T细胞亚群百分比在免疫后220周升高不显著,PO组脾细胞因子IL-10、IL-12和TNF-α水平均分别于10周、6周和8周达峰值,IN组分别在10周、8周和8周达峰值,口服组血清抗体IgG、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3和IgA水平均于8周达峰值,而IN组除IgG和IgA于8周达峰值外,其余均于12周达最高水平,IgE于14周达峰值,两组血清细胞因子IL-10、IL-12和TNF-α水平分别在免疫后(PO组)14、6和8周及(IN组)8、6和8周达最高水平。结论该疫苗可诱导小鼠产生有效的免疫应答。
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单位湖北医药学院附属襄阳医院; 重庆医科大学附属第一医院