17β-雌二醇对髁突软骨细胞增殖的影响机制

作者：张帅; 王江红; 田利杰; 王宝利; 张娟^*

来源：华西口腔医学杂志, 2021, 39(06): 651-657.

• 颞下颌关节骨关节病
• 17β-雌二醇
• 雷帕霉素
• 磷酸化雷帕霉素哺乳动物靶标
• 髁突软骨细胞

目的研究17β-雌二醇(E2)对髁突软骨细胞增殖调节的影响,并初步探讨磷酸化雷帕霉素哺乳动物靶标(p-mTOR)在该调节过程中发挥的作用。方法取6周龄雌性SD大鼠髁突软骨细胞进行原代培养,从第二代分别给予不同浓度的E2和/或雷帕霉素(RAPA);CCK8法检测不同给药条件下,髁突软骨细胞在第24、48、72小时的增殖情况;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测软骨细胞中雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)、自噬相关基因6 (Beclin-1)、自噬相关基因5 (ATG-5)、Ⅱ型胶原(COLⅡ)相关基因的表达;蛋白印迹(Western blot)法检测软骨细胞中ERα、ERβ、Beclin-1、脂质化轻链蛋白3B (LC3-Ⅱ)、p-mTOR相关蛋白的表达及加入雌激素受体拮抗剂后各组细胞p-mTOR的表达。结果 E2可显著促进体外培养的髁突软骨细胞增殖,并在10-8mol·L-1浓度下达到峰值;RAPA可以显著抑制细胞增殖。10-8mol·L-1E2上调软骨细胞ERα、COLⅡ基因表达(P<0.01)和ERα、p-mTOR蛋白表达(P<0.05),下调软骨细胞Beclin-1、ATG-5基因表达(P<0.05)和Beclin-1、LC3-Ⅱ蛋白表达(P<0.05);RAPA可以上调细胞Beclin-1和LC3-Ⅱ蛋白水平(P<0.01),下调p-mTOR的表达(P<0.01);ERα拮抗剂可以显著降低细胞中p-mTOR的表达(P<0.01)。结论 E2在浓度为10-8mol·L-1时可有效通过ERα-p-mTOR途径激活mTOR的磷酸化,抑制自噬,提高髁突软骨细胞增殖速度。

• 单位
  天津医科大学; 天津医科大学口腔医院