苦瓜皂苷L对异丙肾上腺素诱导的大鼠H9c2心肌细胞肥大的作用研究

作者：李洪铭; 邱雨美; 谢梦蝶; 熊印华; 尚广彬; 涂珺; 汤喜兰^*

来源：中药新药与临床药理, 2021, 32(12): 1762-1768.

DOI：10.19378/j.issn.1003-9783.2021.12.005

• 苦瓜皂苷L
• 苦瓜
• 心肌肥大
• 异丙肾上腺素
• 甘油磷脂代谢
• 大鼠H9c2心肌细胞

目的探究苦瓜皂苷L对异丙肾上腺素诱导的大鼠H9c2心肌细胞肥大的保护作用及机制。方法 (1)体外培养大鼠H9c2心肌细胞,采用MTT法评价不同浓度的异丙肾上腺素(0.625、1.25、2.5、5、10μmol·L-1)和不同浓度的苦瓜皂苷L(1.625、3.125、6.25、12.5、25.0μg·mL-1)对心肌细胞活力的影响。(2)采用异丙肾上腺素诱导心肌细胞肥大模型。实验分为正常组、模型组、苦瓜皂苷L干预组和苦瓜皂苷L单独组。分别通过细胞拍照结合ImageJ软件测量、荧光定量PCR法考察苦瓜皂苷L 12.5μg·mL-1对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞表面积和心肌肥大相关胚胎基因ANP、β-MHC及α-SKA表达的影响。在此基础上,选择参与甘油磷脂代谢的酶VI组磷脂酶A2(PLA2G6)、二酰甘油激酶ζ(DGKZ)、甘油磷酸胆碱磷酸二酯酶1(GPCPD1)为指标,评价苦瓜皂苷L对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞上述3种酶基因表达的影响;进一步以PLA2G6和DGKZ蛋白为指标,采用Western Blot法考察苦瓜皂苷L对异丙肾上腺素诱导的心肌细胞PLA2G6和DGKZ蛋白表达的影响。结果 (1)与正常组比较,异丙肾上腺素(0.625～10μmol·L-1)和苦瓜皂苷L(1.625～25μg·mL-1)对心肌细胞活力没有明显影响(P>0.05)。本研究选用异丙肾上腺素10μmol·L-1和苦瓜皂苷L 12.5μg·mL-1进行实验。(2)与正常组比较,模型组心肌细胞表面积增加(P<0.05),心肌肥大相关胚胎基因ANP、β-MHC、α-SKA表达上调(P<0.05),PLA2G6、DGKZ、GPCPD1 mRNA表达上调(P<0.05),PLA2G6和DGKZ蛋白表达增加(P<0.05);与模型组比较,苦瓜皂苷L干预组能够降低心肌细胞表面积(P<0.05),下调心肌肥大相关胚胎基因ANP、β-MHC、α-SKA表达(P<0.05),下调PLA2G6、DGKZ、GPCPD1 mRNA表达(P<0.05),降低PLA2G6和DGKZ蛋白表达(P<0.05)。结论苦瓜皂苷L可缓解异丙肾上腺素诱导的心肌细胞肥大,可能与其抑制甘油磷脂代谢酶PLA2G6和DGKZ的表达有关。

• 单位
  江西科技师范大学; 江西中医药大学中医基础理论分化发展研究中心