苍白密螺旋体Tp0751黏附蛋白的表达、纯化及免疫反应性分析

作者：刘双全; 汪世平; 吴移谋; 高冬梅; 赵飞骏; 周帅锋

来源：中华医院感染学杂志, 2009, (20): 2693-2696.

• 苍白密螺旋体
• 黏附蛋白
• Tp0751
• 重组蛋白
• 免疫反应性

目的表达苍白密螺旋体(梅毒螺旋体)黏附蛋白Tp0751,纯化表达产物并进行免疫反应性分析,为探索Tp0751重组蛋白在梅毒致病过程中的作用奠定基础。方法通过生物信息学分析,去除Tp0751信号肽序列,构建原核表达体进行诱导表达;Ni亲合层析柱纯化重组蛋白,Western-印迹检测其免疫反应性。结果成功构建了PET-28a(+)-0751原核表达载体,经表达、纯化后获得了相对分子量约为26×103的融合蛋白,其表达产物占全菌总蛋白的>30%,并且主要可溶性形式存在;Western-印迹检测其能与梅毒患者阳性血清发生特异性反应,具有良好的抗原性。结论重组表达的Tp0751黏附蛋白为可溶性蛋白,且具有良好的免疫反应性,为进一步研究其在Tp0751黏附蛋白在梅毒致病过程中的作用和其生物学功能奠定了基础。

• 单位
  南华大学; 中南大学湘雅医学院