PARK2介导的线粒体自噬对锰诱导的神经细胞毒性的作用

作者：张玥; 胡宏涛; 赵颖; 蒋智钢; 周远忠; 范奇元^*

来源：遵义医科大学学报, 2023, 46(01): 44-51.

DOI：10.14169/j.cnki.zunyixuebao.2023.0016

• SK-N-SH
• 锰
• PARK2
• LC3Ⅱ/Ⅰ
• OPTN
• P62
• 线粒体自噬

目的 用SK-N-SH细胞构建PARK2基因过表达/敲除稳转株，用于阐明PARK2和锰毒性的关系。方法 慢病毒转染SK-N-SH细胞构建PARK2基因过表达/敲低细胞稳转株，分为3组：空载质粒组、PARK2过表达组和PARK2敲低组。以900μM Mn2+对各组细胞染毒24 h后，用荧光探针检测细胞内ROS水平，电镜下观察细胞内自噬小体数量，WB法检测OPTN、LC3II/I、P62蛋白的表达，ELISA法检测细胞培养基中DA水平。结果 与空载质粒组比，PARK2过表达组细胞内Parkin蛋白表达增多、ROS水平降低、自噬小体数量增多、P62和OPTN蛋白表达下调、LC3II/I值增加及DA水平升高(P<0.05)。PARK2敲低组细胞内Parkin蛋白表达降低、P62和OPTN蛋白表达上调(P<0.05),而ROS水平、自噬小体数量、LC3II/I值以及DA含量与空载质粒组无差异。结论 过表达PARK2基因能提高Parkin蛋白的表达，促进细胞内线粒体自噬来清除受损的线粒体，从而保护细胞。OPTN和P62蛋白可能作为PARK2的下游蛋白参与线粒体自噬过程。

• 单位
  遵义医科大学; 遵义医药高等专科学校; 公共卫生学院