富血小板血浆调节滑膜炎保护软骨细胞

作者：陈尉; 张国如; 何健东; 霍少川^*

来源：中国组织工程研究, 2020, 24(29): 4643-4649.

DOI：10.3969/j.issn.2095-4344.2814

• 富血小板血浆
• 滑膜
• 炎症
• 软骨
• 细胞
• 关节炎

背景:研究证实,滑膜炎分泌的炎症因子通过加速关节软骨的分解代谢而成为骨性关节炎发展的主要原因,基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶13在骨性关节炎中起关键作用。目的:探究富血小板血浆治疗骨性关节炎的有效作用机制。方法:分离并提取大鼠膝关节滑膜细胞和软骨细胞分别培养,腹主动脉取血制备富血小板血浆制剂。将滑膜细胞分为空白对照组和大肠杆菌脂多糖处理组,脂多糖处理组用脂多糖刺激滑膜细胞制造滑膜炎模型;再将滑膜炎细胞分为富血小板血浆处理组和未处理组(脂多糖组)。对照组、富血小板血浆处理组和未处理组3组细胞培养24h后,用ELISA法检测培养基中炎性细胞因子白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的水平,另一部分培养基分别处理软骨细胞,培养48 h后,Western blot检测软骨细胞内Ⅰ型、Ⅱ型胶原蛋白、基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶13蛋白水平的变化,荧光定量PCR检测基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶13 mRNA表达水平的变化。结果与结论:①ELISA检测显示,脂多糖处理组滑膜细胞培养基中白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的水平显著高于对照组和富血小板血浆处理组(P <0.01);富血小板血浆处理组培养基中白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的水平高于对照组(P <0.05);②Western blot检测显示,富血小板血浆处理组软骨细胞中Ⅰ型、Ⅱ型胶原蛋白显著高于对照组和脂多糖处理组(P <0.01),脂多糖处理组低于对照组(P <0.05);③脂多糖组基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶13蛋白显著高于富血小板血浆处理组和对照组(P <0.01);④PCR检测显示脂多糖组基质金属蛋白酶3,13 mRNA显著高于富血小板血浆处理组和对照组;⑤结果表明,富血小板血浆处理能够通过降低滑膜细胞炎性因子白细胞介素1β、白细胞介素6和肿瘤坏死因子α的水平,降低软骨细胞中基质金属蛋白酶3和基质金属蛋白酶13的蛋白和m RNA水平,增加Ⅰ型、Ⅱ型胶原蛋白的表达而发挥保护软骨的作用。

• 单位
  广州市正骨医院; 海南省第三人民医院; 广州中医药大学深圳医院