摘要
目的观察低氧状态下心肌细胞线粒体通透性转换孔(mPTP)的开放功能变化,探讨mPTP在红景天苷保护低氧诱导的心肌细胞凋亡中的作用。方法原代培养心肌细胞,分为对照组、低氧组、30μmol/L红景天苷+低氧组、60μmol/L红景天苷+低氧组、120μmol/L红景天苷+低氧组及25μmol/L环孢素A(CsA)+低氧组。采用流式细胞术检测心肌细胞早期凋亡,NAD+检测试剂盒检测细胞内NAD+浓度,Western blot检测抗凋亡蛋白Bcl-2的表达及胞浆和线粒体细胞色素C(Cyto C)的表达。结果低氧导致心肌细胞凋亡显著增加,细胞内NAD+浓度显著下降;红景天苷预处理可剂量依赖性地显著抑制低氧诱导的心肌细胞凋亡,升高细胞内NAD+浓度;mPTP开放抑制剂CsA能显著抑制低氧诱导的心肌细胞凋亡及NAD+浓度的下降。Western blot结果表明,红景天苷及CsA预处理能明显抑制低氧诱导的心肌细胞Bcl-2表达下调及胞浆Cyto C表达水平的升高,并可提高线粒体Cyto C蛋白表达水平。结论红景天苷可通过抑制心肌细胞mPTP的开放在低氧细胞模型中发挥抗凋亡作用。
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