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摘要
目的 探讨微RNA-223-3p(miR-223-3p)调控NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)/胱天氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)/白细胞介素-1β(IL-1β)信号通路抗小鼠肝纤维化的作用及其机制。方法 将32只ICR小鼠采用随机数字表法分为空白组、模型组、miR-223-3p模拟物（miR-223-3p agomir）组和阴性对照miRNA模拟物（agomir-NC）组，建立四氯化碳小鼠肝纤维化模型。miR-223-3p agomir组和agomir-NC组于第4周末尾静脉注射miR-223-3p agomir及agomir-NC（给药剂量为每只200 nmol/L），每周给药3次，连续给药2周。分别比较4组小鼠血清总胆红素（TBIL）、白蛋白（Alb）、血清透明质酸（HA）、Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、Ⅳ型胶原（Ⅳ-C）表达水平，采用苏木精-伊红（HE）染色及马松（Masson）染色检测肝组织病理改变。采用基因本体分析（GO）、KEGG分析对miR-223-3p进行功能分析，采用Targetscan数据库对miR-223-3p的靶基因进行预测，实时荧光定量PCR(qPCR)及蛋白质印迹法（Western blotting）检测肝组织NLRP3、Caspase-1、IL-1β mRNA及蛋白表达情况。结果 与模型组相比，miR-223-3p agomir组血清TBIL[(24.32±3.24)比（62.21±4.52）]、Alb[(34.12±7.32)比（59.21±8.21）]、HA[(136.12±10.25)比（298.56±32.14）]、PCⅢ[（39.52±4.25）比（78.32±14.21）]、Ⅳ-C[(50.25±6.32)比（165.85±12.35）]表达均明显降低（P<0.05），小鼠肝组织损伤得到明显改善，浸润的炎性细胞明显减少，纤维化程度明显减轻。GO、KEGG富集及miRNA-mRNA-KEGG关联分析结果显示，miR-223-3p可在炎症、免疫等的59个生命进程中发挥作用。靶点预测结果显示NLRP3可能为miR-223-3p的反向靶点。与模型组相比，miR-223-3p agomir组小鼠肝组织中NLRP3、Caspase-1、IL-1β mRNA表达[（1.24±0.12）比（2.17±0.14）、（1.44±0.11）比（2.65±0.18）、（1.31±0.13）比（1.97±0.21）]及蛋白表达[（0.89±0.05）比（1.93±0.04）、（1.29±0.07）比（2.15±0.09）、（1.50±0.05）比（2.52±0.12）]水平均显著降低（P<0.05）。结论 过表达miR-223-3p可抑制NLRP3/Caspase-1/IL-1β信号通路的激活，降低机体炎症反应，改善小鼠肝组织损伤，进而发挥其抗肝纤维化作用。
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