大鼠脑源性神经营养因子的克隆及原核重组表达载体的构建

作者：何玉梅; 邢影; 常春娣; 侯玲玲

来源：神经损伤与功能重建, 2013, 8(06): 407-409.

• 大鼠脑源性神经营养因子
• 密码子优化
• 表达载体构建
• ELISA检测 brain derived neurotrophic factor
• codon optimization
• construction of prokaryotic recombinant expression vector
• ELISA identification

目的:构建重组表达载体pGEX-脑源性神经营养因子(BDNF),探讨其原核表达BDNF的可行性。方法:大鼠BDNF进行密码子优化,人工合成BDNF的全基因序列,经回收、纯化、酶切后连接到pGEX原核表达载体中,将重组质粒pGEX-BDNF转化大肠杆菌BL21细胞中,筛选阳性克隆,经IPTG诱导表达后,利用ELISA方法鉴定其表达的活性。结果:PCR鉴定及测序显示BDNF序列完全正确,BDNF基因的克隆和表达载体构建成功,IPTG诱导表达目的蛋白经ELISA检测,其表达的目的蛋白具有一定的活性。结论:经密码子优化后经人工合成得到BDNF基因片段并成功构建pGEX-BDNF重组表达载体,具有一定的...

• 单位
  吉林大学中日联谊医院; 神经内科; 秦皇岛市骨科医院