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摘要
目的建立高效液相色谱—傅里叶变换离子回旋共振质谱联用法(HPLC-FT-ICR MS)和超高效液相色谱法(UPLC)对葡萄酒中多酚化合物进行定性定量分析,并对灌胃给予大鼠后的入血成分进行鉴定。方法葡萄酒经乙酸乙酯提取,采用HPLC-FT-ICR MS进行成分分析,Waters C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,体积分数为0.2%的甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱;采用UPLC对葡萄酒提取物中9种多酚化合物进行同时含量测定,Waters C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,体积分数为0.2%的甲酸水-乙腈为流动相,梯度洗脱,检测波长为280 nm;葡萄酒多酚提取物灌胃给予大鼠,取灌胃15 min后的血浆,经甲醇沉淀蛋白法前处理,通过HPLC-FT-ICR MS进行入血成分鉴定。结果鉴定出葡萄酒中包含原花青素、酚酸、花色苷、黄烷醇在内的41种多酚类化合物;所测定9种多酚化合物的方法经方法学验证符合要求,测定结果显示,葡萄酒中没食子酸及低聚原花青素含量较高;推断出葡萄酒中9种入血化合物,主要包括原花青素,酚酸等多酚类化合物原型及代谢物。结论所建立的方法适用于葡萄酒多酚体内外化学成分分析,揭示了葡萄酒多酚化合物灌胃后的入血成分,为葡萄酒活性物质基础研究提供了数据支持。
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