胞质分裂阻滞微核法的优化探讨

作者：廖静; 鲁文清; 王春香; 李小峰

来源：中国热带医学, 2016, 16(09): 866-868.

DOI：10.13604/j.cnki.46-1064/r.2016.09.04

• 微核
• 微核试验
• 乙腈
• 人肝肿瘤细胞Hep G2细胞
• 细胞松弛素B

目的改进胞质分裂阻滞微核法(cytokinesis-block micronucleus test,CBMNT),并检验改进后的方法在微核检测中的可行性。方法培养人肝肿瘤细胞Hep G2,分别以苯并芘和二甲基亚砜为阳性对照和溶剂对照,以二溴乙腈染毒,细胞松弛素B阻滞,收集细胞,氯化钾低渗,反复固定,滴片,显微镜下阅片。结果伴随低渗时间的延长,显微镜下Hep G2细胞体积逐渐增大,胞浆染色逐渐变淡,进而细胞膜破裂和部分细胞内容物丢失。伴随传代次数的增多,Hep G2细胞出现不良的生长状态和异常的细胞生长动力学,影响微核试验的重现性。鉴于此,试验中应选择最佳低渗时间60 s和传代2代的Hep G2细胞。在改进后的CBMNT中,与溶剂对照比较,30μmol/L二溴乙腈可诱导Hep G2细胞微核率增加,核分裂指数(NDI)降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论改进后CBMNT实验体系可有效检出化学毒物的遗传毒性,适于染色体断裂作用的筛检。

• 单位
  华中科技大学同济医学院; 深圳市龙岗区疾病预防控制中心; 深圳市龙岗区人民医院; 公共卫生学院