ANO1抑制剂在AngⅡ诱导的VSMC增殖中的作用研究

作者：于杰; 姚刚; 韩晓华; 赵岚^*

来源：国际医药卫生导报, 2023, 29(20).

• 血管紧张素Ⅱ
• 血管平滑肌细胞
• 增殖
• ANO1抑制剂

目的研究钙激活氯通道蛋白1(ANO1)抑制剂在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中的作用。方法研究时间为2019年7月至2022年6月。体外培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞A7r5细胞株, AngⅡ刺激A7r5细胞建立细胞增殖模型, 分别采用10 nmol/L、100 nmol/L、500 nmol/L不同浓度ANO1抑制剂(A01)干预, 同时设置对照组(以等量生理盐水干预), 采用Hoechst 33342荧光染色法观察ANO1抑制剂干预后AngⅡ诱导的VSMC形态学变化, 蛋白免疫印迹法检测ANO1抑制剂干预后AngⅡ诱导的VSMC细胞凋亡相关蛋白表达水平。多组间比较采用单因素方差分析, 组间两两比较采用LSD-t检验。结果 Hoechst 33342荧光染色结果显示, 随着ANO1抑制剂浓度增加, 呈亮蓝色的细胞愈来愈多(染色质凝聚、出现凋亡小体), 即细胞凋亡数量越多。低剂量组、中剂量组、高剂量组凋亡率分别为(17.60±1.36)%、(36.30±3.50)%、(61.25±6.33)%, 均高于对照组凋亡率(4.32±0.51)%, 组间差异均有统计学意义(均P<0.05), 即AngⅡ诱导的VSMC增殖后凋亡与ANO1抑制剂浓度之间存在剂量依赖性。蛋白免疫印迹法检测ANO1抑制剂干预后AngⅡ诱导的VSMC凋亡相关蛋白结果显示, 不同组间EPK、AKT、CDK4、Cyclin D1蛋白相对表达量主效应差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较, 低剂量组、中剂量组、高剂量组EPK、AKT、CDK4、Cyclin D1蛋白相对表达量均降低, 且呈剂量依赖性, 各组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 ANO1抑制剂可显著抑制AngⅡ诱导的VSMC增殖作用, 其机制可能与抑制EPK/AKT信号通路及细胞周期进程有关。

• 单位
  青岛大学; 烟台市烟台山医院; 基础医学院