摘要
观察吗啡对中性粒细胞NF κB亚单位p6 5及其抑制蛋白I κBmRNA表达、p6 5蛋白含量的影响。分离提取 2 0例健康人外周血中性粒细胞 ,以RPMI16 4 0培养液悬浮细胞 ,将细胞按照每孔 1× 10 6个置入培养板。每份细胞分为正常对照组、TNF α组 (2 0 μg/L)、吗啡组 (5 0nmol/L)、芬太尼组 (10 0nmol/L)、丁丙诺啡组 (2nmol/L)、吗啡 5 0nmol/L+TNF α 2 0 μg/L组和芬太尼 10 0nmol/L +TNF α 2 0 μg/L 组、丁丙诺啡 2nmol/L +TNF α 2 0 μg/L组。置CO2 孵箱孵育3h后提取细胞总RNA ,采用RT PCR方法检测中性粒细胞NF κB亚单位p6 5及其抑制蛋白I κBmRNA表达 ;采用免疫蛋白印迹法 (Westernblot)测定p6 5蛋白含量。结果示TNF α组p6 5mRNA表达明显增强 ,约增加 31 3% (P <0 0 1) ,而I κBmRNA的表达减弱约 12 6 % (P <0 0 5 )。单纯吗啡组及吗啡 +TNF α组对p6 5mRNA的表达均显示出抑制作用 ,且吗啡对I κBmRNA的表达有增加趋势 (P <0 0 5 )。芬太尼组、丁丙诺啡组及加TNF α刺激后p6 5及I κBmRNA的表达均无影响 (P <0 0 5 ) ;Westernblot结果亦显示吗啡明显降低p6 5蛋白含量 (P <0 0 5 ) ,而芬太尼和丁丙诺啡则无效果。结果提示 ,吗啡具有抑制中性粒细胞NF κB激活的作用
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单位北京协和医院; 中国医学科学院; 中国协和医科大学