苦参碱通过miR-17-5p/MKNK2分子轴抑制膀胱癌干细胞增殖和侵袭

作者：曹萌华; 邢佳; 支政^*

来源：沈阳药科大学学报, 2022, 39(11): 1354-1361.

DOI：10.14066/j.cnki.cn21-1349/r.2020.1194

• 苦参碱
• miR-17-5p
• 丝裂原活化蛋白激酶相互作用激酶2
• 膀胱癌干细胞
• 增殖
• 侵袭

目的 通过miR-17-5p/MKNK2分子轴研究苦参碱(atrine, MT)对膀胱癌干细胞增殖和侵袭的影响，并阐明其作用机制。方法 采用流式细胞术分选膀胱癌干细胞(transitional cell carcinoma cells, TCCSUP),并用干细胞成球实验检测不同剂量MT处理的膀胱癌干细胞的成球能力，采用CCK-8和Transwell检测膀胱癌干细胞增殖和侵袭，采用RT-qPCR检测膀胱癌干细胞中miRNAs的表达水平，采用Western blot检测MKNK2的表达水平，采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-17-5p和MKNK2的靶向关系。结果 通过分选出的TCCSUP细胞在显微镜下观察发现，细胞生长状态良好，呈球形或椭圆形，细胞膜边界清晰；CCK-8、Transwell和干细胞成球实验检测结果显示，MT可呈浓度依赖性显著抑制膀胱癌干细胞增殖、侵袭以及成球能力，TCCSUP干细胞半数抑制浓度为2 mg·L-1。miR-17-5p在膀胱癌干细胞内异常高表达，MT可显著下调miR-17-5p的表达水平；过表达miR-17-5p可明显促进膀胱癌干细胞的增殖、侵袭以及干细胞成球；同时过表达miR-17-5p和MKNK2可显著MKNK2下调过表达MKNK2对TCCSUP干细胞增殖、侵袭和干细胞成球的抑制作用。结论 MT通过下调miR-17-5p,促进MKNK2的表达，抑制TCCSUP干细胞增殖、侵袭和成球能力。

• 单位
  衡水市人民医院; 河北中医学院; 基础医学院