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摘要
目的探讨普伐他汀对脂多糖诱导的人绒毛外滋养细胞(HTR-8/SVneo细胞)中微小RNA-155(microRNA-155,miR-155)表达及其对滋养细胞功能的影响。方法将体外培养HTR-8/SVneo细胞分成空白对照组、带绿色光蛋白的增强型质粒(enhanced plasmid with green fluorescent protein,pEGFP)-miR-155组(绿色荧光蛋白标记的miR-155质粒转染)、脂多糖组(脂多糖100 ng/ml)、miR-155抑制剂组+脂多糖,普伐他汀+脂多糖组(浓度分别为12.50、25.00、50.00、100.00μg/ml普伐他汀预处理后,再加入100 ng/ml脂多糖)、普伐他汀+pEGFP-miR-155组(50.00μg/ml普伐他汀预处理后再转染pEGFP-miR-155)。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测各组miR-155的表达量、蛋白质印迹法检测各组AP-1亚基p-JunB和p-FosB蛋白的表达水平;检测细胞迁移、侵袭功能和凋亡情况。采用/检验进行统计学分析。结果(1)与空白对照组相比,pEGFP-miR-155组滋养细胞迁移距离较低[分别为(274.70±18.82)和(181.00±8.62)μm],穿膜细胞减少[(123.00±4.36)和(63.00±6.08)个],细胞凋亡率升高[分别为(5.40±0.68)%和(9.27±0.68)%](P值均<0.05)。与脂多糖组相比,miR-155抑制剂+脂多糖组的迁移距离更长[(166.30±5.07)与(242.00±18.07)μm],穿膜细胞增多[(71.67±6.12)与(109.00±7.81)个],细胞凋亡率降低[(14.40±1.69)%与(6.23±0.44)%](P<0.05)。(2)脂多糖组HTR-8/SVneo细胞miR-155的mRNA表达水平为1.65±0.07,明显高于空白对照组的0.79±0.12(P<0.05)。12.50、25.00、50.00、100.00μg/ml普伐他汀+脂多糖组的HTR-8/Svneo细胞中miR-155的mRNA表达水平分别为1.14±0.10、1.02±0.10、0.74±0.15和1.14±0.02,明显低于脂多糖组,其中以50.00μg/ml普伐他汀降低程度最明显(P值均<0.05)。(4)空白对照组、脂多糖组、50.00μg/ml普伐他汀+脂多糖组的磷酸化JunB的蛋白表达水平分别为0.33±0.06、1.22±0.20和0.31±0.02,磷酸化FosB的蛋白表达水平分别为0.37±0.07、0.80±0.13和0.21±0.05。脂多糖组表达水平明显高于空白对照组,50.00μg/ml普伐他汀+脂多糖组明显低于脂多糖组(P值均<0.05)。(5)与脂多糖组相比,50.00μg/ml普伐他汀+脂多糖组的迁移距离增大[(166.30±5.07)与(246.80±13.42)μm],穿膜细胞数增多[(71.67±6.12)与(95.33±2.73)个],细胞凋亡率降低[(14.40±1.69)%与(6.05±0.35)%](P值均<0.05)。与pEGFP-miR-155组相比,50.00μg/ml普伐他汀+pEGFP-miR-155组的迁移距离更长[(197.50±13.86)与(275.80±13.63)μm],穿膜细胞更多[(52.67±5.49)与(125.00±6.66)个],细胞凋亡率降低[(8.90±1.00)%与(5.05±0.35)%](P值均<0.05)。结论普伐他汀能抑制炎症转录因子AP-1激活,下调脂多糖诱导的miR-155的表达水平,从而抑制绒毛外滋养细胞过度凋亡,保护其迁移侵袭能力,可能是其抑制子痫前期发展的机制之一。
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