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摘要
基于芬顿试剂(H2O2/Fe2+)-亚甲基蓝(MB)体系，提出了褪色分光光度法测定人血清中过氧化氢酶(CAT)活性。取样品10μL,加入1 mmol·L-1 H2O2底液3.00 mL,于30℃恒温反应15 min,加入1.00 mol·L-1 H2SO4溶液1.00 mL终止酶促反应，充分振荡后依次加入0.10 mmol·L-1 MB溶液5.00 mL和0.01 mol·L-1 FeSO4溶液1.00 mL,室温反应5 min后用水定容至50 mL。以水为参比，测定体系在波长665 nm处的吸光度，随同测定CAT空白体系吸光度，以二者差值(ΔA)计算CAT活性。结果表明：还原型染料MB于665 nm处有最大吸收，摩尔吸光系数为9.5×104L·mol-1·cm-1,Fe2+催化H2O2氧化MB发生褪色反应，CAT对其具有抑制作用；CAT活性在0.01～0.06 U·mL-1内与ΔA呈线性关系，检出限(3s/k)为0.002 4 U·mL-1;方法用于6个不同年龄健康人血清样品分析，结果显示CAT活性为36.3～63.2 U·mL-1,并且儿童和老人血清中CAT活性明显高于成年人，测定值的相对标准偏差(n=6)为1.7%～3.6%,加标回收率为92.0%～104%。
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