IFN-γ对人脐带间充质干细胞细胞因子分泌和免疫调节蛋白表达的体外细胞学研究

作者：王立林; 傅泽钦; 廖延; 胡隽源; 曾桂芳; 胡樾; 曾伟杰; 谢长峰; 曾劲峰^*; 刘沐芸^*

来源：中国输血杂志, 2020, 33(09): 865-871.

DOI：10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2020.09.002

• 人脐带间充质干细胞
• 新型冠状病毒肺炎
• 细胞因子风暴
• 干扰素-γ

目的从细胞学方面探讨治疗新冠肺炎患者临床使用的人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)在体外连续制备过程中其细胞因子和免疫调节蛋白的基础分泌水平,以及探究IFN-γ刺激hUC-MSCs后对细胞因子和免疫调节蛋白的影响。方法首先,利用ELISA等方法检测在连续传代扩增hUC-MSCs中多种细胞因子(IL-6、IL-1β、TGF-β、HGF和PGE-2)和免疫调节蛋白(PD-L1和IDO1)的基础表达水平和稳定性;其次,探究hUC-MSCs受到炎症因子IFN-γ刺激后因子分泌和蛋白表达的变化情况。结果 hUC-MSCs在连续传代中其9种MSC相关表面标志物没有明显改变;P0代hUC-MSCs分泌高水平的HGF和TGF-β,但会随着传代增加而分泌水平显著下降;而IL-6和PGE-2则会随着传代增加而分泌上升;IL-1β总体基础表达水平不高;同时,WB和流式结果显示,免疫抑制相关的蛋白IDO1和PD-L1在正常情况下几乎不表达。而当hUC-MSCs受到炎症因子IFN-γ刺激后,细胞因子分泌普遍没有明显上调,其中HGF和PGE-2刺激后还出现了显著下降的趋势;但是免疫抑制相关蛋白IDO1和PD-L1的表达却显著上升,具有统计学意义。结论 hUC-MSCs在连续传代过程中不同细胞因子的表达水平变化具有一定的差别。在受到炎症因子IFN-γ的激活后,可能通过提高IDO1和PD-L1的蛋白表达来发挥免疫抑制的作用。此结果为hUC-MSCs治疗新冠肺炎临床疗效提供理论依据。

• 单位
  深圳市北科生物科技有限公司; 个体化细胞治疗技术国家地方联合工程实验室（深圳）; 深圳市血液中心