摘要
目的探讨微小RNA-21-5p(miR-21-5p)是否具有抗人Ⅱ型肺泡上皮细胞(ATⅡ)凋亡的作用。方法体外培养人ATⅡ细胞,待细胞生长至光镜下可见层状体和微绒毛时用于实验。将细胞分为空白对照组(直接培养,不予任何处理)、过氧化氢(H2O2)损伤组(加入0.5 mmol/L H2O2)、miR-21-5p过表达组〔加入感染复数(MOI)为100的miR-21-5p慢病毒过表达载体与0.5 mmol/L H2O2共培养〕和空病毒对照组(加入miR-21-5p慢病毒空白载体与0.5 mmol/L H2O2共培养)。各组分别于细胞培养0、12、24、36、48 h采用细胞增殖及毒性检测试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖情况;于培养24 h采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果①细胞增殖活性检测结果:随着细胞培养时间的延长,空白对照组细胞增殖活性逐渐增强,而加入0.5 mmol/L H2O2处理后细胞增殖活性则逐渐下降;但miR-21-5p过表达组细胞增殖活性较H2O2损伤组和空病毒对照组下降缓慢,48 h时细胞增殖活性明显高于H2O2损伤组和miR-21-5p空病毒对照组〔吸光度(A)值:0.295±0.005比0.184±0.005、0.169±0.002,均P<0.05〕。说明H2O2及慢病毒均加快了细胞损伤,而miR-21-5p可抑制细胞凋亡。②细胞凋亡检测结果:与空白对照组比较,加入0.5 mmol/L H2O2处理后细胞凋亡率明显升高;而miR-21-5p过表达组细胞凋亡率较H2O2损伤组和空病毒对照组均明显降低〔早期细胞凋亡率:(14.31±0.12)%比(24.50±0.12)%、(23.41±0.13)%,晚期细胞凋亡率:(8.12±0.13)%比(9.71±0.11)%、(10.41±0.15)%,总体细胞凋亡率:(22.33±0.12)%比(34.21±0.10)%、(33.82±0.14)%,均P<0.05〕,进一步证明miR-21-5p具有抗细胞凋亡作用。结论 miR-21-5p具有抗人ATⅡ凋亡的作用。