摘要
目的研究葛根素是否通过下调miR-196a-3p促进大鼠成骨细胞增殖和分化及其潜在作用机制。方法将大鼠成骨细胞CP-R091分为:对照组、葛根素组、转染组和葛根素+转染组,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活性,RT-qPCR检测细胞中miR-196a-3p表达,Western印迹检测细胞中Runx2蛋白及细胞分化相关蛋白骨桥蛋白(OPN)、碱性磷酸酶(ALP)表达。结果与对照组比较,葛根素处理后CP-R091细胞增殖活性增强(P<0.05),细胞中miR-196a-3p表达水平降低(P<0.05),OPN和ALP蛋白表达水平升高(P<0.05);与anti-miR-NC组比较,抑制miR-196a-3p表达后CP-R091细胞增殖活性增强(P<0.05),细胞中OPN和ALP蛋白表达水平升高(P<0.05);与葛根素+miR-NC组比较,葛根素+miR-196a-3p组CP-R091细胞增殖活性降低(P<0.05),细胞中OPN、ALP蛋白表达降低(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实miR-196a-3p靶向负调控Runx2的表达;与pcDNA3.1组比较,过表达Runx2后CP-R091细胞增殖活性增强(P<0.05),细胞中OPN和ALP蛋白表达升高(P<0.05);与葛根素+si-NC组比较,葛根素+si-Runx2组CP-R091细胞增殖活性降低(P<0.05),细胞中OPN、ALP蛋白表达降低(P<0.05)。结论葛根素下调miR-196a-3p并通过靶向Runx2促进大鼠成骨细胞增殖和分化。
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单位迁西县人民医院; 协和医院