本发明提供了一种IMP检测蛋白及其制备方法与应用。试剂内的IMPCP1蛋白对IMP有特异性响应,并且响应迅速,抗干扰能力强,通过PT-SpyCatcher/SpyTag系统固定于环氧基修饰的磁珠上,提高了稳定性,检测操作简便,还可回收使用,经济性好。该试剂盒的试剂可以直接与发酵液上清在酶标板内反应,数秒即可反应平衡,放置到酶标仪内读取荧光值即可。相比于IMP的常规检测方法如高效液相色谱和质谱省时省力更经济。