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摘要
目的 观察抑制内源性胶质纤维酸性蛋白 (glialfibrillaryacidicprotein ,GFAP)基因表达对恶性胶质瘤细胞生物学特性的影响 ,为进一步深入研究GFAP基因在胶质瘤恶性转化及诱导分化治疗中的作用提供实验基础。方法 构建反义GFAP逆转录病毒表达载体 ,经包装后以病毒上清感染人恶性胶质瘤细胞系CHG 5 ;采用RT PCR、原位杂交以及免疫细胞化学方法检测GFAP基因及其蛋白的表达 ;并通过形态学、细胞生长曲线、软琼脂克隆形成及流式细胞分析等观察抑制GFAP基因表达后CHG 5细胞形态、增殖和细胞周期进程的变化。结果 反义逆病毒感染后CHG 5细胞GFAPmRNA及其蛋白表达显著减弱甚至缺失 ,瘤细胞异型性增加 ,细胞增殖速度加快 ,体外成瘤能力增强 ,S期、G2 /M期细胞比例升高。结论 抑制内源性GFAP基因表达可使CHG 5细胞呈现更为恶性的表型 ,提示GFAP基因在调控胶质瘤细胞分化程度及恶性生物学行为方面具有重要作用
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单位第三军医大学; 第三军医大学西南医院
