柴胡皂苷B通过Nrf2/ARE信号缓解Caco-2细胞氧化损伤

作者：杨慧; 黄丽丽^*

来源：中国现代医生, 2023, 61(20): 61-67.

• 柴胡皂苷B
• 屏障损伤
• Nrf2/ARE
• 氧化应激

目的 探讨柴胡皂苷B(saikosaponin B,SSB)对棕榈酸(palmitic acid,PA)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS联合诱导的人结直肠腺癌细胞(Caco-2)屏障损伤的保护作用及潜在机制。方法 利用Caco-2细胞构建肠道屏障模型，采用随机数字表法将细胞分为对照组(CON组，n=6)，模型组(PA+LPS组，n=6)和柴胡皂苷B干预组(PA+LPS+SSB组，n=6)，通过测量跨膜电阻(transepithelial electrical resistance,TEER)值和紧密连接蛋白的表达水平，评价SSB对Caco-2细胞屏障损伤的保护作用。通过检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)和脂质过氧化物含量评估细胞氧化压力。通过定量聚合酶链反应和蛋白质免疫印迹法检测SSB对Nrf2/ARE信号通路相关基因及蛋白的表达水平的影响。通过敲降Nrf2验证SSB改善细胞屏障功能是否通过Nrf2/ARE途径。结果 PA+LPS+SSB组Caco-2细胞的TEER值、ZO-1和Occludin-1的蛋白水平显著高于PA+LPS组(P<0.05)。PA+LPS组细胞内丙二醛(malondialdehyde,MDA)、4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)、蛋白羰基含量(protein carbonyl content,PCC)和ROS含量均显著高于对照组(P<0.05),PA+LPS+SSB组的4-HNE、MDA、ROS含量和PCC均显著低于PA+LPS组(P<0.05)。PA+LPS+SSB组细胞内Nrf2和p-Nrf2的蛋白水平、Nqo1和Ho-1的m RNA水平、过氧化氢酶(catalase,CAT)和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)酶活性均显著高于PA+LPS组(P<0.05)。PA+LPS+SSBsiNrf2组细胞中ZO-1和Occludin-1的蛋白水平和转录水平均显著低于PA+LPS+SSB组(P<0.05),ROS、4-HNE、MDA含量和PCC均显著高于PA+LPS+SSB组(P<0.05)。结论 SSB通过激活Nrf2/ARE信号通路增加了肠上皮细胞的抗氧化能力，抑制了PA和LPS引起的Caco-2细胞氧化应激和屏障损伤，对肠上皮细胞具有良好保护作用。

• 单位
  宁波市医疗中心李惠利医院