新城疫病毒classⅠ和classⅡ微型基因组的构建及其复制效率差异性的比较

作者：于洋; 仇旭升; 韦娜娜; 詹媛; 丁娜; 于圣青; 秦爱建; 丁铲

来源：中国预防兽医学报, 2012, (05): 355-359.

• 新城疫病毒
• 微型基因组
• 共转染 Newcastle disease virus
• mini-genome
• helper plasmids

为研究新城疫病毒(NDV)微型基因组的复制效率,本实验分别以NDV 9a5b(ClassⅠ)病毒株和La Sota(ClassⅡ)病毒株基因组骨架为平台,插入绿色荧光蛋白(GFP)作为报告基因替代病毒的整个编码区,只保留与病毒复制、转录和病毒包装相关的调控区域Leader和Trailer,构建获得的微型基因组DNA片段反向插入反向遗传载体TVT(0.0)中,从而构建了两株病毒的微型基因组质粒。同时,将相应病毒株的NP、P和L 3个基因分别克隆至pCI-neo载体中,构建3个辅助质粒的真核表达系统。通过将微型基因组和辅助质粒共转染BSR T7/5T7-5细胞,表明在相同转染条件下,无论使用哪一种...

• 单位
  中国农业科学院上海兽医研究所; 扬州大学; 国家家禽工程技术研究中心