摘要
为了研究CsATG8a基因的功能,从黄瓜cDNA中克隆得到CsATG8a基因,对其进行蛋白结构、理化性质等生物信息学分析,构建超表达载体和基因编辑突变载体并转化拟南芥,对转基因植株和野生型植株进行碳饥饿和盐胁迫处理,分析植株表型并进行生理指标测定。结果表明CsATG8a基因含有一个长357 bp的完整开放+阅读框,编码的CsATG8a蛋白为亲水性的非分泌性蛋白,没有信号肽和跨膜结构域,含118个氨基酸。碳饥饿胁迫下,超表达CsATG8a拟南芥对碳饥饿胁迫不敏感,具有一定的抵抗能力,超表达CsATG8a与WT及突变体拟南芥在根长生长量、鲜重与叶绿素含量方面有显著差异;盐胁迫处理,超表达CsATG8a拟南芥根长生长量、鲜重高于WT、突变体植株,而相对电导率较低,对这三种类型植株进行O_(2)~(-)的检测发现超表达植株的含量最低,突变体植株的含量最高,CsATG8a基因具有抵抗盐胁迫的能力;综上,本研究获得了CsATG8a基因的编码区序列,并初步阐述了该基因转入拟南芥植株后在碳饥饿和盐胁迫下相关表型和生理指标分析,为筛选黄瓜中响应非生物胁迫功能基因的研究提供了研究基础。
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