基于直接注射-多级质谱全扫描技术的人血红蛋白快速肽图分析

作者：杨湘芬; 张珂; 王世聪; 于娟; 牛晓雅; 陈蔚; 吴念; 宋青青^*; 宋月林^*

来源：Chinese Journal of Analytical Chemistry, 2023, 51(03): 383-395.

DOI：10.19756/j.issn.0253-3820.221384

• 肽图分析
• 直接注射–多级质谱全扫描技术
• 人血红蛋白
• 蛋白类药物

利用液相色谱–串联质谱法(LC-MS/MS)进行肽图分析，是目前单克隆抗体等蛋白类药物质量控制的主要方法，然而，LC-MS/MS分析具有费时、费溶剂和成本高等缺点。本研究以人血红蛋白(Human hemoglobin, Hb)为例，考察利用直接注射–多级质谱全扫描技术(DI-MS/MSALL)进行肽图分析的可行性。Hb经胰蛋白酶水解后，多肽样品通过流动注射泵直接注入QTOF-MS离子源，采用MS/MSALL记录MS1谱图以及每个单位质荷比窗口(1 Da)的MS2谱图信息，所获得的质谱信息与Skyline软件给出的21个理论肽段质谱信息进行匹配，初步指认了20个肽段。常规的LC-MS/MS肽图分析检测出了所有21个理论肽段。DI-MS/MSALL的MS1图谱与LC-MS/MS的平均MS1图谱相近，主要为各肽段带电荷数1～4的准分子离子信号，以双电荷为主，而MS2图谱均以y+离子为主。因此，DI-MS/MSALL分析蛋白肽图的能力与LC-MS/MS相似，并且具有分析通量高、溶剂用量少及成本低等优点，可作为快速分析肽图的有效工具，实现蛋白类药物的高通量分析。

• 单位
  北京中医药大学; 漳州片仔癀药业股份有限公司