基于NLRP3炎症小体探讨葛根素对缺氧致肺动脉平滑肌细胞焦亡的影响

作者：张晓丹; 李文娣; 张茹; 盛洁静; 张佳男; 刘慧宇; 李松林

来源：中国药房, 2021, 32(11): 1337-1344.

• 葛根素
• 肺动脉平滑肌细胞
• 焦亡
• NOD样受体蛋白3炎症小体

目的:探讨葛根素(Pue)对缺氧诱导的肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)焦亡的影响及其调控机制。方法:以大鼠PASMCs为对象,将其随机分为常氧组、缺氧组和缺氧+Pue组(0.2 mmol/L),除常氧组外,其余各组均于37℃、5%CO2、3%O2条件下培养24 h以建立缺氧模型。采用Western blot法检测细胞中焦亡相关蛋白[NOD样受体蛋白3(NLRP3)、胱天蛋白酶1、白细胞介素1β、凋亡相关斑点样蛋白]的表达水平;采用乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测细胞中LDH的释放量;采用Hoechst 33342/PI双染色法检测焦亡阳性细胞比例。另将PASMCs随机分为常氧+对照质粒组、缺氧+对照质粒组、缺氧+过表达质粒组和缺氧+过表达质粒+Pue组,除常氧+对照质粒组外,其余各组均同法建立缺氧模型;在分别转染对照质粒或NLRP3过表达质粒后,采用Western blot法、LDH释放实验和Hoechst 33342/PI双染色法检测Pue是否通过干扰NLRP3炎症小体来发挥对缺氧致PASMCs焦亡的影响。结果:与常氧组比较,缺氧组细胞中焦亡相关蛋白的表达水平、LDH释放量和焦亡阳性细胞比例均显著升高(P<0.05或P<0.01);而Pue可逆转上述指标(P<0.05或P<0.01)。当NLRP3炎症小体过表达时,细胞中焦亡相关蛋白的表达水平、LDH释放量和焦亡阳性细胞比例均显著升高(P<0.05或P<0.01);且Pue可通过调控NLRP3炎症小体而抑制上述现象(P<0.05或P<0.01)。结论:Pue可通过下调焦亡相关蛋白的表达、减少LDH的释放、降低焦亡阳性细胞比例,从而发挥对缺氧致PASMCs焦亡的抑制作用,其机制可能与抑制NLRP3炎症小体的活性有关。

• 单位
  哈尔滨医科大学大庆校区; 哈尔滨商业大学