枯草芽孢杆菌β-甘露聚糖酶的克隆表达及重组酶性质研究

作者:张丹阳; 吕育财; 田毅红; 龚大春; 任立伟; 郭金玲*
来源:食品工业科技, 2020, 41(06): 88-105.
DOI:10.13386/j.issn1002-0306.2020.06.015

摘要

为实现对魔芋葡甘聚糖具有高度专一性的β-甘露聚糖酶基因的异源表达,从枯草芽孢杆菌G1中克隆出β-甘露聚糖酶基因Bsman A,将该基因与表达载体pACYCDuet-1连接并转化到E.coil BL21(DE3)中。结果表明:该β-甘露聚糖酶基因Bsman A序列全长为1098 bp,编码366个氨基酸;经Ni柱亲和层析纯化后,测得重组酶分子量大小为38 kD;酶学性质研究结果显示:该酶促反应的最适温度为60℃,最适p H为6.5,在温度50~70℃间,pH4.5~7.0的范围内能保持较好的稳定性。本研究实现了β-甘露聚糖酶的异源表达,为生物催化制备低聚甘露糖的工业化提供了新的选择。