摘要
目的探讨冬凌草甲素对人肝癌细胞Huh-7索拉非尼(Sor)耐药细胞株Huh-7/Sor的影响及其作用机制。方法体外培养Huh-7/Sor细胞株,qRT-PCR检测miR-217和ABCC1 mRNA的表达水平,Western blotting检测ABCC1蛋白的表达水平;用冬凌草甲素处理Huh-7/Sor细胞后,CCK-8法检测细胞活力,Annexin V/PI染色检测细胞凋亡,Western blotting检测凋亡蛋白和ABCC1的表达水平;数据库预测miR-217与ABCC1的结合位点,转染miR-217 mimic或inhibitor后检测ABCC1的蛋白水平,荧光素酶报告基因检测ABCC1 3‘UTR区域活性。结果与Huh-7细胞相比,Huh-7/Sor细胞中miR-217的表达水平显著下调,ABCC1的表达水平显著上调(P<0.05);冬凌草甲素能抑制Huh-7/Sor细胞的增殖,促进细胞凋亡,上调miR-217的表达水平,抑制ABCC1的表达(P<0.05);miR-217能与ABCC1 3‘UTR区域结合,抑制ABCC1的蛋白表达水平(P<0.05)。结论冬凌草甲素能通过上调miR-217而抑制ABCC1的表达,进而抑制Huh-7/Sor细胞增殖,诱导凋亡。
-
单位驻马店市中心医院