初发2型糖尿病患者早期内皮祖细胞生物学功能的变化及其意义

作者：刘峰; 雷闽湘; 谢晓云

来源：南昌大学学报(医学版), 2009, 49(08): 1-5+141.

DOI：10.3969/j.issn.1000-2294.2009.08.001

• 2型糖尿病
• 内皮祖细胞
• 生物学功能
• eNOS

目的观察初发2型糖尿病(T2DM)患者外周血内皮祖细胞(EPC)黏附和迁移及血管生成能力的改变,探讨EPC在T2DM血管病变发生、发展中的可能作用。方法取20例初发T2DM(T2DM组)无血管并发症患者、20例健康体检者(正常对照组)外周血EPC培养,用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,接种在培养板内,培养7 d后对贴壁细胞进行细胞鉴定和部分生物学功能分析。激光共聚焦显微镜鉴定FITC标记荆豆凝血素-Ⅰ(FITC-UEA-I)和DiI标记的乙酰化低密度脂蛋白(DiI-ac-LDL)双染色阳性细胞为正在分化的EPC。胰蛋白酶消化后计数贴壁细胞观察EPC黏附能力;改良的Boyden小室测定观察EPC的迁移能力;体外血管生成实验观察EPC体外血管生成能力。RT-PCR检测EPC eNOS mRNA表达水平,western blot检测EPC eNOS蛋白表达水平,硝酸酶还原法检测EPC NO分泌。结果与正常对照组比较,T2DM组黏附、迁移细胞数均显著减少(P<0.05或P<0.01),NO水平显著下降(P<0.05)。RT-OCR检测结果显示,T2DM组eNOS mRNA表达水平为0.34±0.02,正常对照组为0.48±0.04,2组比较差异有统计学意(P<0.05)。western blot检测结果显示,T2DM组EPCeNOS蛋白表达水平为0.36±0.19,正常对照组为0.49±0.16,2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论初发T2DM患者外周血EPC部分生物学功能明显受损,黏附、迁移及体外血管生成能力显著减退,EPC NO合成减少,可能与T2DM患者EPC血管生成能力受损有关。EPC的生物学功能异常或许可作为初发T2DM患者血管病变发生、发展的一个早期生物学标志物。

• 单位
  中南大学湘雅医院