旋毛虫Ts-Sp-7蛋白的表达纯化及其多克隆抗体的制备

作者：张胜兰; 刘琰; 李岩松; 刘晓雷; 白雪; 唐斌; 王学林; 刘明远^*; 周玉^*

来源：中国兽医科学, 2019, 49(11): 1368-1373.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0191

• 旋毛虫
• Ts-Sp-7蛋白
• 原核表达
• 间接免疫荧光

为给旋毛虫病的诊断及疫苗研制提供备选抗原,对本实验室获得的旋毛虫Ts-Sp-7基因(GenBank登录号EU263332.1)进行PCR扩增,构建原核表达载体,进行表达纯化,Western-blot分析。制备多克隆抗体进行间接免疫荧光分析。通过PCR扩增出1 372 bp的Ts-Sp-7基因。SDS-PAGE结果显示,该蛋白大小为46 ku左右,与理论分子质量一致。Western-blot结果显示,该目的蛋白与10 000条/头感染剂量不同感染时间的猪阳性血清均呈现特异性条带。制备的多克隆抗体效价为1∶350 000。Ts-Sp-7多克隆抗体的间接免疫荧光鉴定结果显示,Ts-Sp-7蛋白在旋毛虫肌幼虫期存在于虫体表面。

• 单位
  动物科学学院; 吉林大学; 长江大学