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摘要
目的 研究JA信号传导途径对广藿香萜类生物合成的调控作用，从广藿叶片中克隆广藿香JAR1基因。方法 根据广藿香转录组PcJAR1基因序列，设计特异性引物，从广藿香叶片中克隆出PcJAR1基因，进行生物信息学分析，同时构建pET-28a-PcJAR1、pET-32b-PcJAR1原核表达载体，并对异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白表达的条件进行考察。结果 表明该序列全长1725 bp,编码574个氨基酸，预测分子量为64.15 KD,等电点为5.69,主要定位在细胞核，对结构域的预测中发现PcJAR1氨基酸序列中含有GH3保守区域，可能与茉莉酸(JA)和生长素(Indole-3-acetic acid, IAA)的合成有关。利用无缝克隆技术构建pET-28a-PcJAR1、pET-32b-PcJAR1原核表达载体并导入BL21(DE3)表达菌中，考察不同浓度IPTG诱导对PcJAR1蛋白表达量的影响。结果表明PcJAR1融合蛋白主要以包涵体的形式在沉淀中表达。结论 该研究成功克隆广藿香PcJAR1基因，初步探讨PcJAR1编码蛋白的诱导条件，为进一步研究广藿香PcJAR1蛋白的结构和功能奠定基础。
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