间充质干细胞对大鼠急性肺损伤模型的干预研究

作者：方阅; 刘振威^*

来源：贵州医药, 2019, 43(08): 1179-1345.

• 血管紧张素转换酶2
• 人脐带间充质干细胞
• 博来霉素
• 急性肺损伤

目的通过博来霉素诱导大鼠急性肺损伤为研究模型,观察携带ACE2基因的人脐带间充质干细胞对大鼠急性肺损伤的影响。方法取正常足月剖宫产健康婴儿脐带分离人脐带间充质干细胞,经流式细胞术鉴定细胞表面抗原;以三质粒共转染法在293T细胞中制备病毒颗粒Lenti-ACE2,并转染HUMSCs;采用一次性气管内滴注BLM(5 mg/kg)建立肺损伤的动物模型,收集损伤前和滴注BLM手术后3、7、14 d肺泡灌洗液及肺组织进行相关指标检测。计数法测定肺泡灌洗液中中性粒细胞数量;BCA法测定肺泡灌洗液中总蛋白含量;化学法测定MPO活性;HE染色法观察肺组织病理学形态;RT-PCR测定肺组织中细胞因子INF-γ、IL-4的mRNA变化,ELISA测定肺组织中细胞因子TNF-α的含量,Western-blotting测定肺组织ACE2蛋白的表达。结果 HUMSCs可成功分离提纯,转染Lenti-ACE2前后,HUMSCs细胞表型不受影响。携带目的基因ACE2的HUMSCs在输入大鼠体内后,ACE2与HUMSCs发挥协同作用,能有效降低ALI大鼠肺部中性粒细胞浸润和总蛋白渗出,改善血管通透性程度,降低肺组织中促炎因子INF-γ基因水平,并能提高抗炎因子IL-4以及ACE2的表达,从而减轻ALI大鼠病理损伤程度。结论人脐带间充质干细胞携带ACE2基因可以作为治疗急性肺损伤的一种有效方法。

• 单位
  上海市第一人民医院