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摘要
目的 培养脐血来源NK细胞，通过细胞和动物水平验证其用于肝癌治疗的安全性和有效性。方法 NK细胞体外诱导培养，观察培养过程细胞形态、细胞总数、增殖倍数，流式检测其中CD3-CD56+细胞的比例，细胞毒性检测验证NK细胞对癌细胞的杀伤活性；建立肝癌裸鼠皮下荷瘤模型，采用瘤内与静脉方式注射NK细胞，密切观察不同时间段实验组和对照组裸鼠移植瘤大小、体积、质量以及裸鼠存活状态。荷瘤40天后取肿瘤组织进行分析。通过流式分析、HE染色和免疫荧光检测NK细胞移植在裸鼠体内第37天含量，分析NK细胞在裸鼠体内残留情况。结果 脐血分离单个核细胞经体外诱导培养的NK细胞能保持典型的NK细胞表型特征，细胞活性好、增殖能力强、纯度高，对多种癌细胞系均具有良好的杀伤作用。与对照组相比，NK细胞注射组均能抑制肝肿瘤生长。NK细胞移植35天后，尾静脉组肿瘤大小显著下降（P<0.05）。同时NK细胞在体内无明显残留，表明NK细胞小鼠体内移植无致瘤性。结论 本研究制备的脐血NK细胞符合临床研究需求，可作为肝癌患者临床治疗的替代方案，为下一步开展临床研究提供前期基础。
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