健脾益气方对D-氨基半乳糖致急性肝损伤大鼠的保护作用及机制研究

作者：王超; 音金萍; 卓少元^*

来源：广西中医药, 2021, 44(05): 62-69.

• 健脾益气方
• 急性肝损伤
• NLRP3炎性小体
• 网络药理学
• 分子对接

目的:在网络药理学和分子对接研究的基础上,从Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎性小体活化途径探讨健脾益气方对D-氨基半乳糖(D-GalN)致大鼠急性肝损伤(ALI)的防治作用。方法:利用网络药理学和分子对接技术分析健脾益气方防治ALI的潜在靶标,并根据分析结果选择NLRP3炎性小体活化通路经动物实验进行验证。将30只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组以及健脾益气方低、中、高剂量组(JP-L组、JP-M组、JP-H组),每组6只。除正常组大鼠一次性腹腔注射600 mg/kg生理盐水外,其余各组大鼠给予腹腔注射同比例D-GalN诱导ALI模型。造模后JP-L、JP-M、JP-H组分别按成人用药量的3、6、12倍(5.25 g/kg、10.5 g/kg和21 g/kg)灌胃给药,每日2次,连续给药2 d。末次给药后立即取材,采用HE染色观察肝脏组织病理形态学的改变;生物化学法检测大鼠血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)及肝组织中半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶1(Caspase-1)的活性;ELISA法检测血清中白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素18(IL-18)和核因子κB(NF-κB)的含量;蛋白免疫印迹法检测肝组织中NLRP3和凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的蛋白含量。结果:通过网络药理学分析发现健脾益气方可能通过多靶标多途径防治ALI,运用分子对接技术发现NLRP3、IL-1β、RELA/NF-κB p65与3种活性成分均能有效结合。动物实验结果显示,与正常组比较,模型大鼠肝细胞损伤及炎细胞浸润程度较重,血清AST、ALT、IL-1β、NF-κB的含量,肝组织中NLRP3和ASC蛋白表达水平,以及Caspase-1酶活性均明显升高(P<0.01);与模型组比较,健脾益气方中、高剂量组以上各指标均明显下降(P<0.05或P<0.01)。结论:结合网络药理学、分子对接技术以及动物实验明确了健脾益气方对D-GalN致大鼠ALI具有一定的保护作用,其机制可能与下调NLRP3炎症小体的活化有关。

• 单位
  广西中医药大学