摘要
目的:探讨干扰NBS1基因表达对肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响。方法:应用Lipofectamine 2000 将NBS1特异性小干扰RNA(si NBS1)转染至肝癌细胞Hep G2中,以空载脂质体作为对照组。采用RT-PCR及Western blot法检测NBS1基因表达情况,采用CCK-8法检测转染质粒后si NBS1对Hep G2细胞增殖能力的影响,采用流式细胞术检测si NBS1对Hep G2细胞凋亡的影响。结果:不同浓度si NBS1 (10 nmol/L、20nmol/L、50 nmol/L)均能抑制Hep G2细胞中的NBS1基因在mRNA水平上的表达(P <0.05或P <0.01)。最高浓度si NBS1(50 nmol/L)能抑制NSB1蛋白产物的表达水平(P <0.05)。CCK-8实验显示,转染不同浓度si NBS1的Hep G2细胞与对照组相比,细胞活力明显减弱(P <0.05或P <0.01),转染48 h后增殖率下降最为显著;流式细胞检测结果显示,细胞凋亡的比率在转染后明显升高(P <0.05或P <0.01),并随浓度增加而更为显著。结论:干扰NBS1基因的表达可以明显抑制Hep G2细胞的增殖,并促进癌细胞凋亡。
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单位首都医科大学附属北京佑安医院; 山东省医学科学院附属医院; 山东第一医科大学; 北京市肝病研究所