半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3在亚洲带绦虫实验感染乳猪肝组织的表达

作者：许士刚; 牟荣; 张科; 杨林; 郎书源; 包怀恩

来源：中国人兽共患病学报, 2017, 33(04): 326-342.

• 亚洲带绦虫
• 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3
• 乳猪
• 肝脏

目的分析亚洲带绦虫实验感染乳猪后囊尾蚴寄生处肝脏组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cysteine aspartyl proteinase 3,Caspase-3)的表达变化情况,为探讨Caspase-3在亚洲带绦虫感染致乳猪肝损伤中的作用提供基础资料。方法将采自贵州省都匀市良亩乡的亚洲带绦虫孕节解剖后,以生理盐水反复清洗并离心收集虫卵。20d龄约克施格杂交乳猪12头随机分为实验组和对照组各6头,实验组以定量虫卵15万个/头灌胃感染,于感染后第15d和第75d解剖乳猪,取实验组囊尾蚴寄生处肝组织和对照组对应部位肝组织,运用实时荧光定量PCR和免疫印迹方法分别定性定量分析Caspase-3在实验组和对照组中mRNA水平、蛋白水平的表达,并进一步运用免疫组织化学方法对Caspase-3在实验组和对照组中的蛋白表达水平和蛋白表达部位进行分析和定位。结果感染后第15d,实时荧光定量PCR结果显示实验组Caspase-3mRNA水平低于对照组(P=0.011),免疫印迹结果和免疫组化结果均显示实验组Caspase-3蛋白表达量低于对照组(P=0.008,P=0.004);此外,实验组感染后第75d的Caspase-3mRNA水平、蛋白表达量均高于实验组感染后第15d的样本(P=0.018,P=0.003,P=0.002);免疫组织化学结果显示Caspase-3阳性染色主要定位在肝细胞胞质中,呈黄色或棕黄色。感染后第75d实验组和对照组各项结果差异均无统计学意义。结论 Caspase-3在亚洲带绦虫感染早期的乳猪肝组织中低表达,而感染晚期正常表达,提示Caspase-3可能参与了亚洲带绦虫致乳猪早期肝损伤的调节。

• 单位
  贵州医科大学