摘要
目的 基于Akt/mTOR通路探讨药熨疗法对神经根型颈椎病(CSR)大鼠神经细胞超微结构及自噬因子表达的影响。方法 选取4周龄SPF级SD大鼠18只,体重150~200 g,随机选取其中6只作为空白组,其余建立CSR模型。造模成功后,将其按随机数字表法分为模型组、药熨组,每组各6只。空白组、模型组不予任何处理,正常饲养。药熨组选取膀胱经、督脉、胆经进行中药药熨,连续7 d。实验结束后,采用HE染色观察神经细胞结构;透射电子显微镜观察神经细胞超微结构;Western blot检测p-Akt、p-mTOR、Beclin-1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达水平。结果 HE染色可见空白组神经根组织形态基本正常。模型组组织受损较严重,神经根外膜包裹不完整,纤维排列紊乱,部分纤维轴突消失;胞体数量明显减少,核仁不明显。药熨组组织形态部分受损,神经根外膜包裹较完整,纤维排列较整齐,间质有轻度炎症细胞浸润。透射电子显微镜下可见空白组细胞胞质丰富,各细胞器形态正常。模型组细胞核有空洞,线粒体膜模糊,部分嵴断裂,胞质内见大量溶酶体与自噬小体。药熨组细胞质丰富,线粒体部分膜破裂,部分嵴断裂溶解,胞质内见溶酶体与自噬小体。模型组p-Akt、p-mTOR蛋白表达低于空白组,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1高于空白组,差异有高度统计学意义(P <0.01)。药熨组p-Akt、p-mTOR蛋白表达高于模型组,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、Beclin-1低于模型组,差异有高度统计学意义(P <0.01)。结论 药熨疗法可能通过提高p-Akt、p-m TOR蛋白表达激活Akt/mTOR通路发挥抑制细胞过度自噬、减少细胞凋亡、促进受损神经根复原的作用。
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单位广西中医药大学第一附属医院