摘要

目的:建立一种2,2-联苯基-1-苦基肼基-高效液相色谱(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl-high performance liquid chromatography,DPPH-HPLC)法在线筛选杨梅叶中黄酮类抗氧化活性成分,并对抗氧化活性进行检测和评价。方法:采用Shimadzu C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm)反相HPLC梯度洗脱法分离杨梅叶中黄酮类成分,通过DPPH-HPLC法快速筛选出具有抗氧化活性的化合物,并以2,2-联苯基-1-苦基肼基(DPPH)自由基清除实验、ABTS自由基清除实验及铁离子还原(FRAP)实验,抗氧化能力检测方法评价其抗氧化活性。结果:在HPLC条件下可以检测出杨梅叶中所含的杨梅苷、杨梅素、槲皮素和山柰酚四种黄酮类化合物并达到完全分离。四种化合物都具有抗氧化活性,其中槲皮素抗氧化能力最强,其次为杨梅素,且两者抗氧化能力都强于L-抗坏血酸,而杨梅苷和山柰酚抗氧化能力较弱。结论:所建立的DPPH-HPLC法可筛选复杂体系中的抗氧化活性成分。