TAT-HBX-EGFP蛋白的表达与纯化

作者：刘宁; 石英; 魏征; 陈德喜; 娄金丽

来源：胃肠病学和肝病学杂志, 2011, (01): 41-43.

• TAT-HBx-EGFP质粒
• 构建
• 融合蛋白
• 表达与纯化 TAT-HBx-EGFP plasmid
• Construction
• Fusion protein
• Expression and purification

目的构建TAT-HBx-EGFP质粒,转化大肠埃希菌BL21,进行蛋白的表达、鉴定及纯化。方法 PCR扩增目的基因HBx,进行EcolR1单酶切,与经EcolR1单酶切的TAT-EGFP质粒进行连接,转化大肠埃希菌BL21,利用IPTG对其进行诱导。应用West-ern blot方法鉴定表达的融合蛋白,采用Ni2+-金属螯合亲和层析柱法对融合蛋白进行纯化。结果得到构建好的TAT-HBx-EGFP质粒及纯化的目的融合蛋白TAT-HBX-EGFP。结论通过对TAT-HBx-EGFP质粒的构建和TAT-HBX-EGFP蛋白的表达与纯化,为进一步研究HBX蛋白的致肝癌作用奠定了实验基础。

• 单位
  北京市肝病研究所; 首都医科大学附属北京佑安医院