摘要
利用减压浓缩结合乙醇提取工艺从转基因微藻培养液中获得β-石竹烯粗提液,通过建立大孔树脂联合C18球形柱分离方法对产物进一步浓缩纯化并考察其抗氧化能力。从6种不同类型的大孔树脂中筛选出HPD-100型大孔树脂作为β-石竹烯的最适吸附剂,通过对静态吸附与解吸附过程中温度、pH、时间和解吸剂的优化,使静态吸附与解吸率分别达到87.8%和80.8%。在动态吸附解吸实验中,初始上样流速采用2 BV·h-1,上样体积28 BV时,吸附率达98.0%。采用无水乙醇以1.5 mL·min-1流速洗脱,洗脱体积7 BV,解吸率达64.8%。随后,洗脱液采用C18柱,以甲醇作为流动相,上样体积5 mL,洗脱流速1.0 mL·min-1,收集到的样品中β-石竹烯纯度达99.0%,较粗提液提高了63.2%,表明该分离方法效果显著。采用得到的β-石竹烯进行体外体内抗氧化能力测试,发现在1000 μmol·L-1时对DPPH、ABTS和·O2-清除能力分别为82.2%、76.7%和82.4%,添加10 μmol·L-1时PC12细胞内ROS含量降低了40.8%。此外,分子对接模拟表明β-石竹烯与SOD、CAT、POD和GPX均具有良好的结合效果。
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