猪流行性腹泻病毒双抗夹心ELISA的建立

作者：雷利; 彭姣; 祁振强; 秦智峰; 卢超

来源：中国动物检疫, 2014, 31(12): 65-69.

• 猪流行性腹泻病毒
• 卵黄抗体
• 双抗夹心ELISA

用猪流行性腹泻病毒(PEDV)免疫蛋鸡后提取抗猪流行性腹泻病毒的特异性卵黄抗体为捕获抗体,鼠抗猪流行性腹泻病毒多克隆抗体为检测抗体,建立了猪流行性腹泻病毒病原检测的双抗夹心ELISA,其最适包被抗体浓度为1:4000(12.35μg/m L),鼠抗猪流行性腹泻病毒的多克隆抗体最佳浓度为1:6000(10.25μg/m L),样品反应时间为30min,酶标抗体工作浓度为1:6000,并以OD450≥0.130作为阳性判断标准。该方法与猪传染性胃肠炎、猪轮状病毒、猪流感病毒、大肠杆菌K88、K99、987P、F41等病原无交叉反应。对经猪流行性腹泻病毒PCR检测的100份粪便样本进行检测表明,8份PCR检测阳性样本中6份为本法阳性;PCR阴性者本法全部阴性。实验结果表明该方法具有良好的特异性和敏感性,可用于猪流行性腹泻病毒的快速检测。

• 单位
  深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心; 深圳市宝舜泰生物医药股份有限公司