BRAF突变对结直肠癌细胞甲基化、细胞活力、凋亡和迁移的影响

作者：刘赛娜; 刘航宇; 程波; 丁姗姗; 刘珊; 许琳; 孙锁柱^*

来源：诊断病理学杂志, 2021, 28(11): 918-923.

• 结直肠癌
• BRAF突变
• 甲基化
• 细胞活力
• 细胞凋亡
• 细胞迁移

目的探究BRAFV600E突变对结直肠癌细胞甲基化水平、细胞活力、凋亡能力和迁移能力的影响。方法应用BRAF野生型状态的结直肠癌细胞系SW480作为实验样本,构建BRAFV600E突变质粒和空质粒,脂质体转染进入SW480细胞,将样本分为BRAFV600E突变组、空质粒对照组和空白对照组,采用qPCR法验证转染效果;采用qPCR检测甲基化转移酶DNMT1和DNMT3A的变化;应用Methylight法检测CIMP的变化;应用CCK8实验检测细胞活力;应用TUNEL凋亡实验检测细胞凋亡能力;采用Transwell实验检测细胞迁移能力;应用均值±标准差和t检验进行统计描述和统计推断。结果处理组过表达BRAFV600E的SW480细胞DNMT1的mRNA的相对表达量显著低于空质粒对照组(P=0.016)和空白对照组(P=0.010),DNMT3A的mRNA的相对表达量显著高于空质粒对照组(P=0.038)和空白对照组(P=0.034),CACNA1G、NEUROG1和CRABP1的甲基化相对表达量显著高于两对照组(P<0.05),CCK8实验处理组细胞吸光值显著高于空质粒对照组(P=0.000)和空白对照组(P=0.000),TUNEL实验处理组细胞凋亡率显著低于空质粒对照组(P=0.000)和空白对照组(P=0.000),Transwell实验各组细胞穿越数无显著差异(P>0.05)。结论 BRAFV600E突变能够使DNMT1表达量减少,使DNMT3A表达量增高;使CACNA1G、NEUROG1和CRABP1的甲基化水平显著增高,但不足以影响CIMP分型;使结直肠癌细胞活力增强、凋亡能力减弱,但不影响结直肠癌细胞的迁移能力。

• 单位
  河北北方学院; 基础医学院; 北京中医药大学